ویتامین D یک ویتامین و همچنین یک هورمون استروئیدی است که عمدتاً شامل VD2 و VD3 است که ساختار آنها بسیار مشابه است. ویتامین D3 و D2 به 25 هیدروکسیل ویتامین D (شامل 25-دی هیدروکسیل ویتامین D3 و D2) تبدیل می‌شوند. 25-(OH)VD در بدن انسان، ساختار پایدار و غلظت بالایی دارد. 25-(OH)VD نشان دهنده مقدار کل ویتامین D و توانایی تبدیل ویتامین D است، بنابراین 25-(OH)VD بهترین شاخص برای ارزیابی سطح ویتامین D محسوب می‌شود. کیت تشخیصی مبتنی بر ایمونوکروماتوگرافی است و می‌تواند در عرض 15 دقیقه نتیجه را ارائه دهد.