PRINCÍPIO

A tira possui um anticorpo monoclonal (McAb) anti-cal com revestimento na região de teste e um anticorpo IgG anti-coelho de cabra na região de controle, previamente fixado à membrana de cromatografia. A almofada de marcação é previamente revestida com McAb anti-cal marcado com ouro coloidal e anticorpo IgG de coelho também marcado com ouro coloidal. Ao testar uma amostra positiva, o cálcio (cal) presente na amostra se combina com o McAb anti-cal marcado com ouro coloidal, formando um complexo imune. Ao migrar ao longo da tira de teste, o complexo conjugado de cálcio é capturado pelo McAb anti-cal na membrana, formando o complexo “McAb anti-cal-cal-McAb anti-cal marcado com ouro coloidal”, resultando em uma faixa colorida na região de teste. A intensidade da cor está diretamente relacionada ao teor de cálcio. Uma amostra negativa não produz uma faixa de teste devido à ausência do complexo de cálcio conjugado com ouro coloidal. Independentemente da presença ou não de cálcio na amostra, uma faixa vermelha aparece na região de referência e na região de controle de qualidade, o que é considerado um padrão interno de qualidade da empresa.

Procedimento de teste:

1. Retire a vareta de coleta, insira-a na amostra de fezes, recoloque a vareta, rosqueie bem e agite vigorosamente. Repita o procedimento 3 vezes. Ou, utilizando a vareta de coleta, retire cerca de 50 mg de amostra de fezes e coloque-a em um tubo contendo a diluição da amostra, rosqueando bem.

2. Utilize uma pipeta descartável para coletar uma amostra de fezes mais fluida do paciente com diarreia, adicione 3 gotas (cerca de 100 µL) ao tubo de coleta de fezes, agite bem e reserve.

3. Retire o cartão de teste do saco plástico, coloque-o sobre uma superfície plana e marque-o.

4. Remova a tampa do tubo de amostra e descarte as duas primeiras gotas da amostra diluída. Adicione 4 gotas (cerca de 100 µL) da amostra diluída, sem formação de bolhas, verticalmente e lentamente no poço de amostra do cartão com a espátula fornecida e inicie a cronometragem.

5. O resultado deve ser lido em 10 a 15 minutos e torna-se inválido após 15 minutos.